67.120.30 ICS B 52 DB41 河 南 省 地 方 标 准 DB 41/T 1689—2018 大鲵人工繁殖技术规程 Technical regulations for the artificial propagation of Andrias davidianus 2018 - 09 - 29 发布 河南省质量技术监督局 2018 - 12 - 29 实施 发 布 DB41/T 1689—2018 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009《标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写》给出的规则起草。 本标准由河南省农业厅提出。 本标准起草单位：河南师范大学、南阳农业职业学院、济源市渔业技术推广站、济源市宏基鲟鲵养 殖有限公司、洛阳茂发农业科技有限公司、西峡县亚珏金鲵有限责任公司、河南省华鲵生物科技股份有 限公司、河南省水产科学研究院、河南省大鲵保护与发展协会、新乡市质量技术监督局。 本标准主要起草人：乔志刚、李泳、贾武、史朝斌、贾小平、高建敏、冯书伟、王松军、赵道全、 崔桂堂。 I DB41/T 1689—2018 大鲵人工繁殖技术规程 1 范围 本标准规定了大鲵人工繁殖的环境条件、亲鲵培育、人工催产、人工孵化。 本标准适用于大鲵的人工繁殖。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 11607 渔业水质标准 GB/T 18407.4 农产品安全质量 无公害水产品产地环境 3 环境条件 应符合 GB/T 18407.4 的规定。 4 亲鲵培育 4.1 培育池准备 2 2 4.1.1 亲鲵培育池建在室内或室外；单池面积 2 m ～5 m ；池底硬化或铺垫沙砾、设置洞穴。 4.1.2 新建水泥池，提前浸泡池子 50 d～60 d，期间换水 3 次，去除池壁中的碱性。 4.1.3 对于旧池，清理打扫池底，维修洞穴，铺整洞底石沙，要求池壁、池底无渗漏，注、排水 系统畅通。同时，用 2 mg/L～3 mg/L 二氧化氯（8%含量）溶液或 10 mg/L～20 mg/L 高锰酸钾溶液 泼洒消毒。6 h 后，清水冲洗，排出废水。 4.1.4 培育池水源要求充足，保持常流水。 4.2 亲鲵放养 4.2.1 亲鲵消毒 亲鲵放养前用下列方法之一消毒： a) 水温 12 ℃±2 ℃时，3 mg/L～10 mg/L 高锰酸钾溶液，浸浴大鲵 5 min ～10 min。 b) 水温 12 ℃±2 ℃时，1%氯化钠溶液，浸浴大鲵 15 min～30 min。 c) 水温 12 ℃±2 ℃时，0.5 mg/L～1 mg/L 二氧化氯（8%含量）溶液，浸浴大鲵 10 min～15 min。 4.2.2 雌、雄配比 雌:雄配比宜为 1:1。若繁殖群体小 50 尾时，雌:雄配比宜为 1:1～2。 4.3 饲养管理 4.3.1 调节投饵量 4.3.1.1 水温 10 ℃～16 ℃时，按大鲵体重的 2%～4%投饵，3 d 投喂一次。 4.3.1.2 水温 17 ℃～22 ℃时，按大鲵体重的 6%～8%投饵，2 d 投喂一次。 1 DB41/T 1689—2018 4.3.2 阶段培育 4.3.2.1 春、夏季培育（4 月～7 月） 4.3.2.1.1 4 月～5 月，养殖水温上升至 12 ℃以上时，按 4.3.1.1 要求投饵。 4.3.2.1.2 6 月～7 月，养殖水温达到全年最高峰（25 ℃左右），按 4.3.1.2 要求投饵。 4.3.2.1.3 产前 1 个月，控制养殖水温在 18 ℃～21 ℃；调控环境光照强度 300 Lux 以下；模拟自然 生境中的流水声；同时投喂鲜活的泥鳅、鲫鱼等饵料。 4.3.2.2 秋季培育(8 月～11 月) 4.3.2.2.1 8 月～9 月，处于大鲵产卵和产后恢复期，大鲵体质虚弱。产后亲鲵要专池放养；加大水量， 增强水的流动性；维持水温 17 ℃±2 ℃；雄鲵取精当天、雌鲵产卵结束后 2 d 即可投喂，投喂量为亲 鲵体重的 5%左右，饵料鲜活、适口。 4.3.2.2.2 10 月～11 月，亲鲵体质恢复正常，亲鲵进入摄食旺盛阶段。此时可将大鲵的投喂量由占亲 鲵体重的 5%提高到 8%左右。 4.3.2.3 冬季培育(12 月～翌年 3 月) 4.3.2.3.1 进入 12 月～翌年 1 月，水温降至 9 ℃以下时，亲鲵进入冬眠状态，停止投饵。 4.3.2.3.2 翌年 2 月～3 月，水温达到 10 ℃以上，按 4.3.1.1 要求投饵。 4.3.2.3.3 低温冰冻时，要及时破冰补水。 5 人工催产 5.1 催产池 2 2 催产池建在室内或遮阳棚下，砖混结构，内贴瓷砖，池底硬化，并搭建人工洞穴。面积 2 m ～10 m ， 池深 0.8m～1.0m，水深 25 cm～35 ㎝。每池注、排水方便，水质清澈，池水微流，池内光线暗弱。 5.2 催产药物与催产器具 5.2.1 催产药物 催产药物包括：绒毛膜促性腺激素(HCG)、促黄体生成素释放激素(LRH)及其类似物(LRH-A))等。 5.2.2 催产器具 催产器具包括：注射器、显微镜、量具、温度计、吸管、计重器、消毒柜等。 5.3 催产季节 人工饲养已经用于生产的适龄亲鲵(即不是第 1 年用于催产的亲鲵)和春、夏、秋各季培育较好的亲 鲵，性腺成熟早，8 月初催产。初产亲鲵或发育较差的亲鲵 8 月底至 9 月初催产。 5.4 亲鲵配组 5.4.1 催产亲鲵要求 催产用亲鲵无病无伤、体质健壮、副性征明显、性腺发育良好；年龄 7 龄～10 龄，体重 3 kg～8 kg。 同一批催产的雌、雄亲鲵，个体质量相当，配组时避免近亲交配。 5.4.2 雌、雄鉴别 2 DB41/T 1689—2018 雄性大鲵泄殖孔椭圆形，纵轴明显长于横轴，泄殖孔左右各有一椭圆形的橘瓣状肌肉隆起，泄殖孔 内缘两侧有白色米粒状细小突起。雌性大鲵泄殖孔多为圆形，泄殖孔略小，泄殖孔周围无隆起，外缘平 滑，内缘亦无白色米粒状颗粒，孔内缘两侧可见皮层形成的向腔面突出的皱褶。 5.4.3 雌、雄搭配 自然产卵和受精时，雌꞉雄=1꞉2，雄鲵在比例中最少不能低于 1.5；人工授精时，雌꞉雄=1꞉1，雌鲵 在比例中最大不超过 2。无论采取自然受精还是人工授精，当繁殖群体相对较小（少于 50 尾）时，应 提高雄亲鲵比例。 5.5 催产 5.5.1 注射次数 一次注射是指将催产剂量一次注入，使亲鲵发情繁殖。二次注射是将催产剂量分两次注入，首次注 射全量的 1/6～1/10，24 h 后再增注到全剂量。生产中采用一次注射还是二次注射，主要视亲鲵性腺发 育的成熟度、计划催产季节而定。 5.5.2 注射剂量 每千克亲鲵体重注射 HCG2000IU 和 LRH-A20 µg。每尾大鲵注射液体量 0.5 ml～3.5 ml。夏初催产， 水温低，注射剂量可比常量高出四分之一。检查成熟程度好的亲鲵，注射剂量可少些。同一时期催产， 雄鲵注射剂量同雌鲵注射剂量相同。 5.5.3 注射部位 在背腹交汇的皮肤皱褶处。 5.6 人工拉卵、采精和授精 5.6.1 人工拉卵 观察雌鲵在池中有卵带产出后，随机将大鲵轻轻捉起，一人用湿布蒙住大鲵头部，将大鲵腹部朝上 平放在桌台上，轻轻稳住大鲵头部；另一人一手稳住大鲵尾部，一手不停轻拍大鲵腹部；第三人则轻轻 向外拉卵，拉出的卵带顺势放进一个无水干净的瓷盆或烧杯中。采卵结束后，将卵用另一干净的盆或沙 布盖起，等待授精。 5.6.2 人工采精 人工拉卵结束后，及时捕捉发育良好的雄鲵；将大鲵腹部朝上，平放在桌台上。一人用湿布蒙住大 鲵头部，不时向头部轻撒洁净的凉水稳住大鲵；另一人一手稳住大鲵尾部，一手不停轻拍大鲵腹部和泄 殖孔；第三人则轻压腹部，先将膀胱中的尿液排出，擦干泄殖孔周围，用干燥洁净的试管收集挤出的精 液；将装有精液的试管避光存放于冰盆中待查，存放时试管不与冰面直接接触。 5.6.3 人工授精 采取的大鲵精液，经显微镜检查，确认含有活力精子后，直接滴加到事先采集的大鲵卵子上，摇动 盛卵容器，同时用羽毛均匀搅拌精、卵 l min～2 min，使精、卵充分混合，加少量（覆卵即可）蒸馏 水，停 20 min，期间不停摇动盛卵容器，用清水洗卵两次去除污物，将受精卵移入孵化器中孵化。 6 人工孵化 3 DB41/T 1689—2018 6.1 孵化方法 6.1.1 静水孵化 静水孵化是通过定时换水，不时缓慢翻动受精卵使其孵化。静水孵化用水量小，孵化容器简单，孵 化可供选择的环境多。静水孵化方式，受精卵“贴膜”现象普遍，孵化中如出现胚胎“贴膜”，胚胎即 难以继续正常发育，并很快死亡。静水孵化劳动强度大，出苗率低，批量孵化时可操作性差。 6.1.2 静水冲气孵化 静水冲气孵化包括纯氧充气孵化和压缩空气充气孵化。静水冲气孵化出苗率也较低，孵化中关键要 控制冲气力度，冲气量过大，易将受精卵卵黄冲散，气量过小，受精卵不易翻动，胚胎很易“贴膜”。 进行冲气孵化（尤其是冲空气）时，要控制空气中的霉菌污染受精卵，造成孵化失败。 6.1.3 微流水孵化 使受精卵在水微流的状态下进行孵化。采用地下水开展微流水孵化时，需防范水温长期低于 15 ℃。 如果采用地上水孵化，需防范水质污染。 6.1.4 冲气流水孵化 采用冲气和流水相结合的方法进行孵化。 6.2 孵化放卵密度 根据孵化方式不同，孵化放卵密度不同，净水孵化密度低，流水充氧孵化密度高。一般孵化放卵 3 密度为 1000 粒左右/m 水体。 6.3 孵化日常管理 6.3.1 调解水深 孵化水深控制在 10 cm～20 cm。 6.3.2 调控水温 孵化水温控制在 18 ℃～20 ℃。该水温条件下，胚胎 30 d 左右孵化脱膜。 6.3.3 调控水质 维持孵化水体溶氧5 mg/L以上；水体pH值6.5～7.5；水体硬度小于3 mmol/L；铵态氮及亚硝态氮均 小于0.1 mg/L。其他条件应符合GB 11607渔业水质标准要求。 6.3.4 其他孵化管理 6.3.4.1 受精第 1 d，受精卵刚放入孵化容器时，不宜随意翻动，只有当受精卵吸水膨胀从水底上浮 后，方可对其进行操作管理。 6.3.4.2 为防治水霉菌侵袭受精卵，孵化过程中，每 7 d 用高锰酸钾溶液（5 mg/L ～10 mg/L）浸洗 受精卵 1 次，1 次浸洗 3 min～5 min。 6.3.4.3 孵化过程中，为方便受精卵在水中漂动，保护卵黄不被冲散，孵化时可将卵带在两个卵子之 间剪开孵化。孵化过程中，发现死卵及时清理。 _________________________________ 4