ICS 07.080 A21 中华人民共和国国家标准 GB/T 38578—2020 水产源致敏性蛋白快速检测 毛细管电泳法 Rapid determination of the allergenic protein from aquatic animals origin- Capillary electrophoresis 2020-03-31实施 2020-03-31发布 国家市场监督管理总局 发布 国家标准化管理委员会 GB/T 38578—2020 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由中国标准化研究院提出并归口。 本标准起草单位：中国标准化研究院、绿城农科检测技术有限公司、浙江工商大学、北京工商大学、 北京萨姆伯科技有限公司、集美大学、湖南农业大学、温州大学、荣成市华通海洋生物科技有限公司。 本标准主要起草人：马爱进、王川丕、何晓明、周瑾茹、傅玲琳、贾英民、吴琦、郝帅、刘光明、周辉、 陈孝敬、王独、刘翼翔、刘忠甫、王彦波。 GB/T385782020 水产源致敏性蛋白快速检测 毛细管电泳法 1范围 本标准规定了用毛细管电泳法测定水产源致敏性蛋白的方法 本标准适用于甲壳类原肌球蛋白、甲壳类精氨酸激酶和鱼类小清蛋白含量的快速检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T30891水产品抽样规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 致敏性蛋白 allergenic protein 能够使机体产生过敏反应的蛋白质。 4原理 试样中的致敏性蛋白经蛋白提取液提取和阴离子交换层析纯化，采用毛细管电泳法测定，迁移时间 定性，外标法定量。 5 试剂或材料 除非另有规定，仅使用分析纯试剂。 5.1水 GB/T6682规定的一级水。 5.2甲醇 色谱纯。 5.3 3三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液 三羟甲基氨基甲烷1.21g，加900mL双蒸水溶解，用6mol/L盐酸溶液调pH至7.5.用蒸馏水定 容至1000mL，用0.45μm滤膜过滤，超声震荡（功率200W）30min，室温保存。 1 GB/T38578—2020 5.4氯化钠溶液 氯化钠14.61g，适量去离子水溶解，定容至500mL，用0.45um滤膜过滤，超声震荡（功率200W） 30min，室温保存。 5.5 磷酸盐缓冲液 氯化钠8.00g，氯化钾0.20g，磷酸氢二钠1.44g，磷酸二氢钾0.24g，将上列试剂加人定量容器中， 蒸馏水溶解后定容至1000mL，用6mol/L盐酸溶液调pH至7.4，用0.45μm滤膜过滤，超声震荡（功 率200W)30min，室温保存。 5.6虾原肌球蛋白标准样品 纯度≥98%。 5.7 虾精氨酸激酶标准样品 纯度≥98%。 5.8鱼小清蛋白 纯度≥98%。 5.9 9标准品储备液 致敏性蛋白标准品（虾原肌球蛋白、虾精氨酸激酶、鱼小清蛋白）0.0010g，加人1mL磷酸盐缓冲 液于1.5mL离心管中，漩涡震荡混匀，制得1mg/mL蛋白标准储备液，每100uL分装成1管，冻存于 -20℃。 5.101mol/L氢氧化钠溶液 氢氧化钠4.00g，适量双蒸水溶解后定容至100mL，用0.45μm滤膜过滤，超声震荡（功率200W） 30min，室温保存。 5.110.1mol/L氢氧化钠溶液 氢氧化钠0.400g，适量双蒸水溶解后定容至100mL，用0.45μm滤膜过滤，超声震荡（功率200W） 30min，室温保存。 5.12硼酸-硼砂缓冲溶液 精密称取四硼酸钠（Na2B,O：10H,O)0.9525g，加人80mL双蒸水溶解，用1mol/L氢氧化钠溶 液调pH至9.2.用双蒸水定容至100mL，用0.45μm滤膜过滤，超声震荡（功率200W）30min，室温 保存。 5.13标准品工作液 1mL磷酸盐缓冲液，漩涡震荡混匀，每种标准品工作液的质量浓度均为5ug/mL、10uμg/mL、25μg/mL、 40μg/mL、50μg/mL，4℃保存2周。 5.14苯甲基磺酰氟溶液 苯甲基磺酰氟0.174g，溶于10mL异丙醇，漩涡震荡混匀，保存于-20℃。 2