ICS65.020.20 CCSB05DB21 辽宁省地方标准 DB21/T3741—2023 玉米单倍体育种技术规程 TechnicalstandardofHaploidbreedingtechnologyinMaize 2023-05-30发布 2023-06-30实施 辽宁省市场监督管理局 发布 DB21/T3741—2023 I前  言 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由辽宁省农业农村厅提出并归口。 本文件起草单位：辽宁省农业科学院、辽宁省农业发展服务中心。 本文件主要起草人：刘欣芳、王延波、孙成韬、马骏、姜敏、齐欣、张默、金迪、孟庆国、贾钰 莹、刘晓丽、叶雨盛、张洋、周亚光。 本文件发布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议，均可以通过来电和来函等方式进行反 馈，我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。 归口管理部门通讯地址：辽宁省农业农村厅（沈阳市和平区太原北街2号），联系电话：024- 23447862。 文件起草单位通讯地址：辽宁省农业科学院玉米研究所（沈阳市沈河区东陵路84号），联系电 话：024-31029981。 DB21/T3741—2023 1玉米单倍体育种技术规程 1范围 本文件规定了玉米单倍体育种的术语和定义、单倍体诱导、单倍体加倍、DH系鉴定等技术内容。 本文件适用于玉米单倍体育种。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适 用于本文件。 GB/T17315玉米种子生产技术操作规程 DB21/T2996玉米农机农艺融合栽培技术规程 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 单倍体诱导haploidinducing 以玉米单倍体诱导系为父本，育种基础材料为母本，杂交产生单倍体籽粒的过程。 3.2 单倍体籽粒haploidseed 胚的倍性为单倍体的玉米籽粒。单倍体育种应用中表现为糊粉层紫色、胚白色特征的正常成熟籽 粒。 3.3 DH系doublehaploidline 由单倍体加倍获得的双单倍体为DH系，基因型高度纯合，具有性状一致性。 4单倍体诱导 DB21/T3741—2023 24.1育种基础材料选择 根据育种目标选择或构建适宜的玉米资源做母本基础材料。 4.2诱导系选择 根据育种基础材料选择诱导率高、花粉量大、标记明显、抗倒伏、结实性好的诱导系。本地区适 宜应用的诱导系有辽诱1号、辽诱2号、辽诱3号、辽诱4号、CHIO3（高油诱导系）等。本文件应用的 单倍体诱导系均含有R-nj基因控制的紫色标记性状。 4.3诱导方法 4.3.1隔离区诱导 以玉米育种基础材料为母本、单倍体诱导系为父本，杂交制种诱导产生单倍体。隔离区制种按照 GB/T17315执行。 4.3.2人工诱导 以玉米育种基础材料为母本、单倍体诱导系为父本，花期人工杂交授粉诱导产生单倍体。 4.4单倍体鉴选 4.4.1籽粒鉴选 成熟期收获杂交果穗，脱粒后人工鉴选糊粉层紫色、胚白色的籽粒。 4.4.2油分鉴选 成熟期收获由高油诱导系杂交的果穗，晾干后脱粒，采用核磁共振分选系统鉴选油分低于4%的 籽粒。 4.4.3幼胚鉴选 取人工杂交15d~18d的果穗，剥去苞叶，转移至超净工作台已灭菌的大烧杯中，放入75%的酒 精浸泡10min，无菌水冲洗5遍，用刀片切去幼粒表皮，用刀尖挑选发育大小为正常胚60%~85%的 幼胚。 5单倍体加倍 5.1籽粒自然加倍