ICS 59.060.10 W 04 中华人民共和国国家标准 GB/T35933—2018 含脂毛毒杀芬、拟除虫菊酯、 有机磷药物残留量的测定 气相色谱法 Determination for drug residues of toxaphene,synthetic pyrethroid organophosphorus in greasy woolGas chromatography method 2018-02-06发布 2018-09-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T35933—2018 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中国纤维检验局提出。 本标准由全国纤维标准化技术委员会（SAC/TC513）归口。 本标准起草单位：中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所、农业部动物毛皮及制品质量监督检验测 试中心（兰州）、甘肃省农业科学院畜草与绿色农业研究所 本标准主要起草人：牛春娥、杨博辉、熊林、郭天芬、郭婷婷、李晓蓉、岳耀敬、刘建斌、郭健、冯瑞林 许文艳 1 GB/T35933—2018 含脂毛毒杀芬、拟除虫菊酯 有机磷药物残留量的测定 气相色谱法 1范围 本标准规定了采用气相色谱仪-电子捕获检测器（气相色谱仪-氮磷检测器）测定含脂毛中毒杀芬、 拟除虫菊酯、有机磷药物残留量的方法。 本标准适用于测定含脂毛中的毒杀芬药物残留量，氯氟氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯等4种 拟除虫菊酯类药物残留量，以及巴胺磷、二嗪磷、除线磷、皮蝇磷、甲基嘧啶磷、氯蜱硫磷、毒虫畏、乙硫磷、 蝇毒磷等9种有机磷药物残留量。 SAG 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件 GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定 GB/T14269羊毛试验取样方法 3原理 3.1毒杀芬、拟除虫菊酯 化，用气相色谱仪-电子捕获检测器测定，以保留时间定性，外标法定量 3.2有机磷 试样经正已烷十乙醚混合溶剂提取，提取液经中性氧化铝固相萃取柱净化，用气相色谱仪-氮磷检 测器测定，以保留时间定性，外标法定量。 4 试剂和材料 4.1 正已烷：色谱纯；分析纯。 4.2 正已烷十乙醚（2十1，体积比）混合溶液：用分析纯正已烷和乙醚配制 4.3 正已烷十乙酸乙酯（95十5，体积比）混合溶液：用色谱纯正已烷和乙酸乙酯配制。 4.4 正已烷十乙酸乙酯（1十1，体积比）混合溶液：用色谱纯正已和乙酸乙酯配制。 4.5 固相萃取柱：中性氧化铝柱（1000mg）。 4.6 固相萃取柱：弗罗里硅土柱（1000mg）。 4.7 毒杀芬标准物质：纯度≥78%。 4.8 拟除虫菊酯药物标准物质：纯度93%。 4.9 有机磷标准物质：纯度≥97%。 1 GB/T35933—2018 4.10标准储备溶液A：准确称取毒杀芬标准品，用正已烷配制成质量浓度为100ug/mL的标准储 备液。 注：标准储备溶液A在0℃～4℃冰箱中保存有效期为6个月。 4.11标准储备溶液B：准确称取每种拟除虫菊酯药物标准品，用正已烷配制成浓度为100μg/mL的标 准储备液。 注：标准储备溶液B在0℃~4℃冰箱中保存有效期为6个月。 4.12标准储备溶液C：准确称取有机磷药物标准品，用正已烷配制成质量浓度为100μg/mL的标准储 备液，冷藏保存。 注：标准储备溶液C用封口膜封口，在0℃～4℃冰箱中保存有效期为6个月 4.13混合标准工作溶液A：根据需要用正已烷将标准储备溶液A逐级稀释成0.04ug/mL、0.2μg/mL、 0.8μg/mL、3.2μg/mL、5.0μg/mL5个浓度的系列混合标准工作溶液。 注：混合标准工作溶液A在0℃～4℃冰箱中保存有效期为3个月。 4.14混合标准工作溶液B：根据需要用正已烷将标准储备溶液B逐级稀释成0.06ug/mL、0.3μg/mL、 1.2μg/ml.3.6μg/mL、5.0μg/mL5个浓度的系列混合标准工作溶液。 注：混合标准工作溶液B在0℃～4℃冰箱中保存有效期为3个月， 4.15混合标准工作溶液C:根据需要用正已烷将标准储备溶液C逐级稀释成0.03μg/mL、0.10μg/mL、 0.30μg/mL、0.90μg/mL、1.80μg/mL5个浓度的系列混合标准工作溶液 注：混合标准工作溶液C用封口膜封口在0℃～4℃冰箱中保存有效期为3个月。 SAG 5仪器与设备 气相色谱仪-电子捕获检测器（GC-ECD）。 5.2 气相色谱仪-氮磷检测器。 5.3 色谱柱：HP-5毛细管柱（30mX0.32mmX0.25μm）或同类型柱。 5.4天平：0.1mg;0.01g。 5.5旋转蒸发仪。 5.6固相萃取装置。 5.7 索氏提取器：250mL。 5.8氮吹仪。 5.9振荡器。 5.10离心机：3000r/min。 5.11 10mL刻度离心管。 5.12 冰箱。 5.13 滤纸。 6分析步骤 6.1 样品制备 6.1.1实验室样品 按GB/T14269中规定的方法进行取样，取样数量不少于120.0g，抽取的含脂毛样品密封保存，及 时送实验室检测。 6.1.2试验样品 将实验室样品充分混匀，用多点法抽取有代表性的试验样品50.0g，放在恒温恒湿条件下（20℃士 2 GB/T35933—2018 2℃，65%±4%）调节约6h，至平衡状态。 6.1.3试验试样 从调湿平衡的试验样品中抽取10.0g土0.01g试验试样3份，其中2份用于试验，1份备用。 6.2提取 6.3净化 6.3.1毒杀芬、拟除虫菊酯 将萃取后的溶液置于250mL浓缩瓶中，在40℃条件下旋转浓缩至近干，加入2mL正已烷溶解剩 余物，并转移至10mL刻度离心管中，再用4mL正已烷分两次洗脱浓缩瓶，一并加入离心管并定溶至 10mL，放人冰箱，在4℃条件下冷却至少12h。将装有溶液的离心管从冰箱中取出，3s～5s内放入 3000r/min的离心机迅速离心。 液中取2mL，加人中性氧化铝柱，待流尽后，用4mL正已烷十乙酸乙酯混合溶液（4.3）洗脱，收集上述 过柱溶液和洗脱液于离心管中，振荡摇匀备用。 用4mL正已烷十乙酸乙酯混合溶液（4.3）预淋洗弗罗里硅土柱，弃去淋洗液。将振荡摇匀的溶液 转移到弗罗里硅土柱上，并用2mL正已烷十乙酸乙酯混合溶液（4.3）分3次洗脱离心管，洗脱液注入萃 取柱，待溶液流尽后用4mL正已烷十乙酸乙酯混合溶液（4.3）洗脱，收集上述过柱溶液和洗脱液于浓 缩瓶中，旋转浓缩至近干，用正已溶解并定溶至2mL作为样液，供测定。 6.3.2有机磷 将萃取后的溶液置于250mL浓缩瓶中，在40℃条件下旋转浓缩至近干，加入2mL正已烷溶解剩 10mL，放人冰箱，在4℃条件下冷却至少12h。将装有溶液的离心管从冰箱中取出，3s～5s内放入 3000r/min的离心机迅速离心。 用4mL正已烷十乙酸乙酯混合溶液（4.4）预淋洗中性氧化铝柱，弃去预淋洗液。从离心好的上层 清液中取2mL加人中性氧化铝柱，待流尽后，用4mL正已烷+十乙酸乙酯混合溶液（4.4）洗脱，收集上 述过柱溶液和洗脱液于浓缩瓶中，旋转浓缩至近干，用正已烷溶解并定溶至2mL作为样液，供测定。 6.4测定 6.4.1色谱条件 6.4.1.11 色谱条件应保证色谱测定时被测组分与其他组分能够得到有效的分离，可根据不同仪器特点， 对色谱条件进行适当调整。 6.4.1.2毒杀芬推荐以下色谱条件： 一柱温箱温度：初始温度50℃，保持2min后以10℃/min的速率升至280℃后保持30min； 一载气（氮气）流速：3.5mL/min； 氢气流速：3.6mL/min； 一空气流速：110mL/min； 一补偿气（氮气）流速：30mL/min； 3 GB/T35933—2018 进样口温度：250℃； 检测器温度：280℃； 进样量：1.0μL； 不分流进样，2min后开阀。 6.4.1.3拟除虫菊酯推荐以下色谱条件： 柱温箱温度：初始温度80℃，保持1min后以15℃/min的速率升至280℃后保持30min； 载气（氮气）流速：1.5mL/min； 补偿气（氮气）流速：60mL/min； 进样口温度260℃； 检测器温度300℃； 进样量：1.0μL； 不分流进样，1min后开阀。 6.4.1.4有机磷推荐以下色谱条件： 柱温箱温度：初始温度50℃，保持2min后以10℃/min的速率升至280℃后保持30min； 载气（氮气）流速：3.5mL/min； 氢气流速：3.6mL/min； 空气流速：110mL/min； 补偿气（氮气）流速：30mL/min； 进样口温度：250℃； 检测器温度：280℃； 进样量：1.0μL； 不分流进样，2min后开阀。 6.4.2测试 对混合标准工作溶液与样液等体积参插进样，以保留时间定性，以试样峰高或峰面积用外标法 定量。 7结果计算 试样中每种药物残留量按式（1)计算，检测结果为两次平行试验的平均值，计算结果表示到小数点 后2位，数值修约依据GB/T8170。 X 5 ..(1) m 式中： X 试样中每种药物残留量，单位为微克每克（μg/g）； SAG 一由标准曲线得出样液中每种药物的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； V- 一样液最终定容体积，单位为毫升（mL）； 试样的质量，单位为克（g）。 m 8 标准溶液气相色谱图、检出限、回收率和精密度 8.1 标准溶液气相色谱图 毒杀芬标准溶液气相色谱图见图1。