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ICS 71.100.70 Y 42 中华人民共和国国家标准 GB/T 35949—2018 化妆品中禁用物质马兜铃酸A的测定 高效液相色谱法 Determination of prohibited aristolochic acid A in cosmetics- High performance liquid chromatography 2018-09-01实施 2018-02-06发布 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T35949—2018 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会(SAC/TC257)归口。 本标准起草单位:上海佰年诗丹德检测技术有限公司、上海市日用化学工业研究所、上海诗丹德标 准技术服务有限公司、上海相宜本草化妆品股份有限公司。 本标准主要起草人:许纪锋、丁慧、钱勇、武晓剑、王改香、赵鑫、沈君子、辛振强、谢天培 GB/T35949—2018 引 本标准的被测物质是我国《化妆品安全技术规范(2015年版)》规定的禁用物质 禁用物质是指不能作为化妆品生产原料即组分添加到化妆品中的物质。《化妆品安全技术规范 (2015年版)》规定:若技术上无法避免禁用物质作为杂质带人化妆品时,应进行安全性风险评估,确保 在正常、合理及可预见的使用条件下不得对人体健康产生危害 目前我国尚未规定这些物质的限量值,本标准的制定,仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法。 Ⅱ GB/T359492018 化妆品中禁用物质马兜铃酸A的测定 高效液相色谱法 1范围 析步骤、结果计算、回收率与精密度、允许差等内容。 本标准适用于膏霜、乳液、化妆水等皮肤护理类化妆品中马兜铃酸A的测定。 本标准方法检出限为0.3mg/kg,定量限为1.0mg/kg。 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3 高效液相色谱法原理 4试剂与材料 除非另有说明,所有试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。 4.1甲醇:色谱纯。 4.2冰醋酸。 4.3马兜铃酸A标准样品:纯度不小于99%,马兜铃酸A的中文名称、CAS号、分子式、相对分子质 量、化学结构式参见附录A中的表A.1。 4.4马兜铃酸A标准储备溶液:称取标准品0.01g(精确至0.0001g),置10mL容量瓶中,用甲醇溶 解并定容至刻度,配制成浓度约为1mg/mL的标准储备溶液,4℃避光保存。 5 仪器和设备 5.1 高效液相色谱仪(HPLC):紫外检测器[可变波长检测(VWD)或二极管阵列检测器(DAD)1 5.2分析天平:感量0.0001g和0.001g。 5.3 超声波清洗仪。 5.4可调移液器和玻璃移液管:量程分别为100μL~1000μL和1.0mL~10.0mL。 5.50.45μm微孔滤膜。 1 GB/T35949—2018 6分析步骤 6.1样品预处理 称取化妆品1g(精确至0.001g),置具塞锥形瓶中,精密加人甲醇10mL,称定重量,超声15min, 冷却至室温,补足减失的重量,经0.45um滤膜过滤即得。 6.2 高效液相色谱仪参考条件 高效液相色谱仪参考条件如下: a) 色谱柱:EclipsePlusCis(250mmX4.6mm,5μm),或性能相当的色谱柱; 流动相:甲醇+0.5%冰醋酸=70+30(V+V); c) 流速:1.0mL/min; (P 柱温:25℃; (a 检测波长:315nm; f) 进样量:20uL。 3校准曲线的绘制 6.3 分别取标准储备溶液(4.4)0.1mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、5.0mL用一级水定容至100mL,制得 浓度分别为1.0μg/mL、5.0μg/mL10.0μg/mL.20.0pg/mL、50.0μg/mL的标准工作溶液。取各级 标准工作溶液注入高效液相色谱仪,以峰面积与溶液浓度绘制校准曲线。马兜铃酸A标准溶液液相色 谱图参见附录B中的图B.1。 6.4样品测定 取样品溶液(6.1)注人高效液相色谱仪,根据峰的保留时间和紫外光谱图定性。记录色谱峰面积, 从校准曲线上获得对应的马兜铃酸A质量浓度。 6.5 定性确认 液相色谱仪对样品进行定性测定,进行样品测定时,如果检出的马兜铃酸A的色谱峰的保留时间 与标准物质一致,并且在扣除背景后的样品色谱图,该物质的紫外吸收图谱与标准物质的紫外吸收图谱 相一致,则可初步确认存在马兜铃酸A。必要时,阳性样品需用液相色谱-质谱进行确认试验,确认试验 参见附录C。 6.6 空白试验 除不称取试样外,均按上述步骤进行 6.7 平行试验 按以上步骤,对同一试样进行平行试验测定。 7结果计算 试样中马兜铃酸A的含量由色谱数据处理器或按式(1)计算: CXV :(1) m 2 GB/T35949—2018 式中: X——试样中马兜铃酸A的含量,单位为微克每克(μg/g); C一一校准曲线查出测试溶液中马兜铃酸A的质量浓度,单位为微克每毫升(μg/mL); V一一试样定容体积,单位为毫升(mL); 试样的质量,单位为克(g)。 m- 回收率与精密度 8 在添加浓度为15μg/g~100μg/g的范围内,回收率在89%~106%之间,相对标准偏差小于6%。 9 允许差 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的10%。 3 GB/T35949—2018 附录A (资料性附录) 标准物质的中文名称、CAS号、分子式、相对分子质量、化学结构式 标准物质的中文名称、CAS号、分子式、相对分子质量、化学结构式参见表A.1。 表 A.1 标准物质的中文名称、CAS号、分子式、相对分子质量、化学结构式 中文名称 CAS号 分子式 相对分子质量 化学结构式 11000* NO 马兜铃酸A 313-67-7 C, HiINO, 341.27 OCH: 4
GB-T 35949-2018 化妆品中禁用物质马兜铃酸A的测定 高效液相色谱法
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