ICS 65. 140 B 47 GB 中华人民共和国国家标准 GB 9697—2008 代替GB/T9697—2002 王浆 蜂 Royal jelly 2008-06-27发布 2009-01-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB 9697—2008 前言 本标准的第4章是强制性的，其余是推荐性的。 本标准代替GB/T9697—2002《蜂王浆》。 本标准与GB/T9697一2002相比主要变化如下： 由推荐性标准改为条文强制性标准； ——增加了术语和定义； 一修改了蜂王浆的定义； 一调整了蛋白质含量的界限值。 本标准的附录A是规范性附录。 本标准由中华全国供销合作总社提出并归口。 本标准起草单位：南京老山药业股份有限公司、中华全国供销合作总社蜜蜂产品标准化技术委员会 秘书处、中国蜂产品协会蜂王浆专业委员会。 本标准主要起草人：李子健、管春华、李晓栋、陈明虎、杨寒冰 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： GB/T9697—2002。 I GB 9697—2008 蜂王浆 1范围 本标准规定了蜂王浆的定义、等级、品质、试验方法、包装、标志、贮存、运输要求 本标准适用于蜂王浆的生产和贸易。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准 GB/T601化学试剂标准滴定溶液的制备 GB/T5009.4—2003食品中灰分的测定 GB7718预包装食品标签通则 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3. 1 蜂王浆royal jelly 蜂皇浆royal jelly 工蜂咽下腺和上聘腺分泌的，主要用于饲喂蜂王和蜂幼虫的乳白色、淡黄色或浅橙色浆状物质。 4要求 4.1感官要求 4.1.1色泽 无论是粘浆状态还是冰冻状态，都应是乳白色、淡黄色或浅橙色，有光泽。冰冻状态时还有冰晶的 光泽。 4.1.2气味 粘浆状态时，应有类似花蜜或花粉的香味和辛香味。气味纯正，不得有发酵、酸败气味 4.1.3滋味和口感 粘浆状态时，有明显的酸、涩、辛辣和甜味感，上聘和咽喉有刺激感。咽下或吐出后，咽喉刺激感仍 会存留一些时间。冰冻状态时，初品尝有颗粒感，逐渐消失，并出现与粘浆状态同样的口感 4.1.4状态 常温下或解冻后呈粘浆状，具有流动性。不应有气泡和杂质（如蜡屑等）。 4.2等级 根据理化品质，蜂王浆分为优等品和合格品两个等级。 4.3理化要求 产品等级和理化要求见表1。 GB9697—2008 表1产品等级和理化要求 指 优 等品 水分/% 67.5 69.0 10-羟基-2-癸烯酸/% 1.8 1. 4 蛋白质/% 11~16 总糖（以葡萄糖计)/% 15 灰分/% SAG 1. 5 酸度(1mol/LNaOH)/(mL/100g) 30~53 淀粉 不得检出 4.4 安全卫生要求 应符合国家法律、法规和政府规章要求，符合国家有关标准规定的安全卫生要求。 4.5真实性要求 不得添加或取出任何成分。 5试验方法 如无特别说明，各方法所用试剂均为分析纯试剂，水为蒸馏水。 5.1样品制备 采用不锈钢棒、管或勺作为取样器。将样品装人样品瓶内，充分搅拌使混合均匀，作为待测样品。 每件样品应不少于20g。 取样后应立即试验。如不能及时试验，应在一18℃冰箱中冰冻保存。 5.2水分 5.2.1仪器 a） 减压干燥箱； b) 称量瓶：高25mm，直径35mm； c) 分析天平：感量0.0001g。 5.2.2试验步骤 取蜂王浆试样约0.5g，置于已干燥至恒量的称量瓶中，精密称定，摊平，放入减压干燥箱，在温度 75℃压力-0.095MPa～-0.10MPa（-730mmHg～-760mmHg)下干燥4h后取出称量瓶，置干 燥器中，冷却30min后称量，反复干燥直至前后两次质量差不超过2mg，为恒量。 5.2.3计算 蜂王浆中水分含量按式(1)计算： X = (1) mi-ms 式中： 蜂王浆中水分含量，%； 称量瓶和试样的质量，单位为克（g）； m2 称量瓶和试样干燥至恒重后的质量，单位为克（g）； 称量瓶的质量，单位为克（g）。 m: 5.2.4平行试验相对偏差 平行试验相对偏差不得超过0.8%。 2 GB 9697—2008 5.310-羟基-2-癸烯酸 5.3.1试剂 本试验所用水为重蒸馏水。 a) 甲醇：紫外光谱纯或在检测波长处透光率大于30%的分析纯。 b）无水乙醇：优级纯。 c) 内标物：对羟基苯甲酸甲酯，含量99.0%。 d) 10-HDA标准品：99.0%以上。使用前应在放有浓硫酸的减压干燥器内减压干燥24h。 10-HDA标准溶液：取干燥后的10-HDA标准品约25mg，精密称定，加无水乙醇溶解并移人 25mL容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。此溶液每毫升含10-HDA约1mg。 f) 内标溶液：取已干燥过的对羟基苯甲酸甲酯约650mg，精密称定，加无水乙醇溶解并移入 1000mL容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。此溶液每毫升含内标物约0.65mg。 盐酸（c=0.03mol/L）：量取0.1mol/L盐酸100mL，加人200mL重蒸馏水中。 h) 流动相$(CH,OH+0.03mol/LHCI+HzO)=55+10+35。 5. 3. 2 仪器 a) 高效液相色谱仪：配置紫外检测器，记录仪或微处理机； 色谱柱：4.6mm×250mm不锈钢柱，填充无定形硅胶Cis键合相，5μm或10μm； c) 超声波清洗仪； d) 旋涡混匀器； 分析天平：感量0.0001g。 5.3.3试验步骤 5.3.3.1试样处理 样品解冻至室温后用玻璃棒搅匀，取约0.5g，置于已称定的50mL容量瓶中，精密称定，加 0.03mol/L盐酸1mL和水2mL，置旋涡混匀器上混合使试样溶解，加无水乙醇30mL，边加人边轻轻 摇动，再精密加人内标溶液10mL，并用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，立即置超声波浴中超声15min，或 置旋涡混器上振荡15min，取出，在3o00r/min下离心10min后测定。如不能及时测定，应放置在 冰箱中冷藏待测。 5.3.3.2色谱条件 测定波长：210nm；柱温度：35℃；流动相流速：1mL/min。 5.3.3.3校正因子测定 精密吸取10-HDA标准溶液0.5,1,2.3.4，5mL至10mL容量瓶中。精密加入内标溶液2mL，用 无水乙醇稀释至刻度，摇匀。分别吸取此溶液2L，注入色谱仪，用峰面积比值计算，应呈线性，求出校 正因子F。 5.3.3.4试样测定 吸取试样溶液4μL，注人色谱仪，按“内标法”定量。 5.3.4计算 蜂王浆中10-羟基-2-癸烯酸含量按式（2）计算： A×m×100 X2=FX ..(2) A.mi 式中： X2——蜂王浆中10-羟基-2-癸烯酸含量，%； F——校正因子； A,-试样中被测组分峰面积； A试样中内标物峰面积； 3 GB9697—2008 m.—内标物质量，单位为克（g)； mi——试样质量，单位为克（g）。 5.3.5平行试验相对偏差 平行试验相对偏差不得超过2.0%。 5.4蛋白质 5.4.1试剂 a） 浓硫酸（w=95%~98%）； b) 硫酸铜与硫酸钾混合试剂：称取硫酸铜1g、硫酸钾10g,置研钵中混合均匀，研细备用； c） 混合指示剂：量取甲基红乙醇溶液（p=1g/L)2份，溴甲酚绿乙醇溶液（p=2g/L)3份，混匀； d) 水稀释至刻度，振摇使硼酸溶解，备用； e) 氢氧化钠溶液（p=400g/L）：称取氢氧化钠40g，加蒸馏水稀释至100mL； f) 稀硫酸：量取浓硫酸5.7mL，加蒸馏水稀释至100mL； 盐酸标准溶液（0.1mol/L）：按GB/T601配制和标定。使用前准确稀释10倍。 5. 4. 2 仪器 a） 凯氏定氮法消化装置、50mL凯氏烧瓶（如使用远红外消解电炉则配用50mL消解管加曲颈 漏斗)； b）10mL酸式滴定管； SAG c) 分析天平：感量0.0001g； d）半微量法蒸馏装置（见附录A)。 5.4.3试验步骤 5.4.3.1蒸馏装置的清洗 连接蒸馏装置，A瓶中加适量蒸馏水与甲基红指示液数滴，加稀硫酸使成酸性，加玻璃珠或沸石数 粒，从D漏斗加蒸馏水约50mL，关闭G夹，开放冷凝水，煮沸A瓶中蒸馏水。当蒸气从冷凝管尖端冷 凝而出时，移去火源，关H夹，使C瓶中的蒸馏水反冲到B瓶中。开G夹，放出B瓶中的蒸馏水，关B 瓶及G夹。将冷凝管尖端浸人约50mL蒸馏水中，使蒸馏水自冷凝管尖端反冲至C瓶，再冲至B瓶，如 上法放去蒸馏水。如此将仪器洗涤2次～3次。 5.4.3.2消化 取蜂王浆试样约1g置已称定的滤纸上，精密称定后包好，放入凯氏烧瓶或消解管中。加人硫酸铜 与硫酸钾混合试剂2g，再沿瓶壁缓缓加人浓硫酸10mL，充分混合，在瓶口放一小漏斗，使烧瓶成45°斜 置，开始用较低温度缓缓加热，使溶液温度保持在沸点以下，等泡沸停止后，逐步加大电力，待消化溶液 沸腾，保持此状态但不使溶液溢出，待溶液成澄明的绿色后，继续加热30min，冷却后转移至100mL容 量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀备用 5.4.3.3蒸馏 量取20g/L硼酸溶液10mL，置100mL锥形瓶中，加混合指示剂5滴，将冷凝管尖端浸人液面下 以后，精密吸取上述消化溶液5mL，经由D漏斗移人反应管中，再加入400g/L氢氧化钠溶液10mL， 用少量蒸馏水洗D漏斗数次，关G夹，加数毫升蒸馏水于D漏斗中以封闭管路。加热A瓶（瓶中的蒸 留水应滴加稀硫酸保持酸性），进行水蒸气蒸馏，从硼酸溶液开始由酒红色变为蓝绿色时起，继续蒸留 10min后，将冷凝管尖端提出液面，使蒸气继续冲洗1min，用少量蒸馏水淋洗尖端后，停止蒸馏 5.4.3.4滴定 将吸收液用0.01mol/L盐酸标准溶液滴定至由蓝绿色变为灰紫色为终点。 5.4.4计算 蜂王浆中蛋白质含量按式（3）计算： 4 GB9697—2008 ...(3) msX100 式中： 蜂王浆中蛋白质含量，以质量分数表示，%； Vi 滴定试样时0.01mol/L盐酸标准溶液消耗的体积，单位为毫升（mL）； Vo 滴定空白时0.01mol/L盐酸标准溶液消耗的体积，单位为毫升（mL）； 盐酸标准溶液的浓度，单位为摩尔每升（mol/L）； 0.014 氮的毫摩尔质量，单位为克（g）； m4 样品的质量，单位为克（g）； 6.25 氮换算为蛋白质的系数。 5.4.5平行试验的相对偏差 平行试验相对偏差不得超过3.0%。 5.5总糖 5.5.1试剂 a） 葡萄糖标准溶液：精密称取经98℃~100℃干燥