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ICS 65.120 B 46 中华人民共和国国家标准 GB 7300.201—2019 代替GB/T19422—2003 饲料添加剂 第2部分:维生素及类维生素 L-抗坏血酸-2-磷酸酯盐 Feed additives-Part 2:Vitamins, provitamins and chemically well-defined substances having similar effect-L-Ascorbyl-2-phosphate 2019-12-17发布 2020-07-01实施 国家市场监督管理总局 发布 国家标准化管理委员会 GB7300.201—2019 前言 本部分的第1章、第3章、第4章、第5章为强制性的,其余为推荐性的。 GB7300《饲料添加剂》按产品分为若干部分。 本部分为GB7300的第201部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本部分代替GB/T19422—2003《饲料添加剂L-抗坏血酸-2-磷酸酯》,与GB/T19422—2003相比 主要技术变化如下: SAC 一增加了产品规格(见3.2); 一增加了L-抗坏血酸-2-磷酸酯盐含量项目指标,定为标示量的95%~110%(见3.4); 一增加了L-抗坏血酸-2-单磷酸酯盐占L-抗坏血酸-2-磷酸酯盐的比例指标(见3.4) 一增加了总磷的指标(见3.4); 一将总砷含量≤5.0(mg/kg)修改为≤2.0(mg/kg)(见3.4,2003年版的3.2); 将铅含量≤30.0(mg/kg)修改为≤10.0(mg/kg)(见3.4,2003年版的3.2)。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本部分由中华人民共和国农业农村部提出并归口。 本部分起草单位:中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所[国家饲料质量监督检验中心 (北京)工、北京桑普生物化学技术有限公司 本部分主要起草人:索德成、施文娟、田静、李宏、杨曙明、张苏、王石、魏书林。 本部分所代替标准的历次版本发布情况为: GB/T19422—2003。 1 GB7300.201—2019 饲料添加剂 第2部分:维生素及类维生素 L-抗坏血酸-2-磷酸酯盐 1范围 GB7300的本部分规定了饲料添加剂L-抗坏血酸-2-磷酸酯盐的技术要求、试验方法、检验规则及 标签、包装、运输、贮存和保质期。 本部分适用于以L-抗坏血酸与偏磷酸盐(钠、钙、镁等)反应所制得的L-抗坏血酸-2-磷酸酯盐。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 601 化学试剂标准滴定溶液的制备 GB/T 602 化学试剂杂质测定用标准溶液的制备 GB/T 603 化学试剂 试验方法中所用制剂及制品的制备 GB/T6435 饲料中水分的测定 GB/T 6437 饲料中总磷的测定分光光度法 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 8170 数值修约规则与极限数值的表示和判定 GB 10648 饲料标签 GB/T13079- 2006 饲料中总砷的测定 GB/T13080 饲料中铅的测定 原子吸收光谱法 GB/T14699.1 饲料采样 GB/T18634 饲用植酸酶活性的测定 分光光度法 3技术要求 3.1 外观与性状 本品为类白色或淡黄色的粉末。 3.2 2产品规格 产品规格可根据合同要求确定,但L-抗坏血酸-2-磷酸酯盐(以L-抗坏血酸计)含量不得低于35%。 3.3鉴别 应符合L-抗坏血酸-2-磷酸酯盐的最大紫外吸收波长,或者4.4所描述的化学反应的特征。 3.4技术指标 技术指标应符合表1规定。 1 GB7300.201—2019 表1技术指标 项目 指标 L-抗坏血酸-2-磷酸酯盐(以L-抗坏血酸计,占标示量的百分数)/% 95.0~110.0 L-抗坏血酸-2-单磷酸酯盐占L-抗坏血酸-2-磷酸酯盐的比例/%≥ 90.0 干燥失重/% 10.0 总砷/(mg/kg) 2.0 铅/(mg/kg) 10.0 总磷/% 11.0 4试验方法 4.1试剂或材料 除特殊说明外,所有使用的试剂均为分析纯和符合GB/T6682中规定的三级水,色谱用水符合 GB/T6682中规定的一级水,试剂和溶液的制备应符合GB/T601、GB/T602和GB/T603的规定。 4.1.1冰乙酸。 4.1.2 甲醇:色谱纯。 4.1.3 已烷磺酸钠:色谱级。 4.1.4 硝酸溶液:量取10mL硝酸,加90mL水,混匀。 4.1.5 氢氧化钠溶液(1mol/L):称取40g氢氧化钠,用水溶解定容至1000mL,混勾。 4.1.6 硝酸银溶液(0.1mol/L):称取16.9g硝酸银,用水溶解定容至1000mL,混匀。 4.1.7 氨水溶液:量取40mL氨水,加60mL水,混匀。 4.1.8 盐酸溶液(0.1mol/L):吸取9mL盐酸,用水溶解定容至1000mL,混匀。 4.1.9 碳酸钠溶液(0.01mol/L):称取1.05g碳酸钠,用水溶解定容至1000mL,混匀。 4.1.10 冰乙酸溶液:量取5mL冰乙酸,加95mL水,混匀 4.1.11 2,6-二氯靛酚钠溶液:称取295mg2,6-二氯靛酚钠溶于1000mL水中,此溶液可保存1周。 4.1.12 酸性植酸酶:活性单位1000U以上,酶活按GB/T18634测定。 4.1.13 酸性植酸酶溶液:称取1g酸性植酸酶,用冰乙酸溶液溶解定容至100mL,混匀。 4.1.14 偏磷酸溶液:称取1g偏磷酸,用水溶解定容至100mL,混匀 4.1.15 L-抗坏血酸标准溶液:称取0.1g(精确至0.0001g)L-抗坏血酸标准品溶于100mL冰乙酸溶 液中,临用现配。 4.1.16 5L-抗坏血酸-2-磷酸酯镁标准品:纯度大于98.0%。 4.1.17L-抗坏血酸-2-单磷酸酯镁标准储备溶液:称取约0.1g(精确至0.0001g)L-抗坏血酸-2-磷酸酯 镁标准品(4.1.16),置于100mL棕色容量瓶中,加适量25%乙醇溶液使其溶解,并稀释定容至刻度,摇 匀。该标准储备液每毫升含L-抗坏血酸-2-单磷酸酯镁1mg。 4.1.18 (4.1.17)10.0mL于100mL棕色容量瓶中,用水稀释定容至刻度,摇匀。该标准工作液每毫升含L-抗 坏血酸-2-单磷酸酯镁100μg。 4.21 仪器设备 4.2.1电子天平:感量0.0001g、0.001g。 2 GB7300.201—2019 4.2.2超声波水浴。 4.2.3紫外分光光度计。 4.2.4石英比色Ⅲ(1cm)。 4.2.5高效液相色谱仪:带紫外可调波长检测器(或二极管矩阵检测器)。 4.3感官检验 取适量试样置于清洁干燥的容器中,在自然光下观察其色泽。 4.4鉴别试验 4.4.1称取试样2g于100mL烧杯中,加水30mL溶解,过滤。取滤液10mL,加硝酸溶液(4.1.4) 20mL,加热20min。取试液5mL,滴加氢氧化钠溶液(4.1.5)至中性,加硝酸银溶液(4.1.6)1mL,即 生成浅黄色沉淀;分离,沉淀在氨水溶液或硝酸溶液中均易溶解。 4.4.2称取试样0.3g于250mL的容量瓶中,加人50mL盐酸溶液(4.1.8)溶解,用碳酸钠溶液(4.1.9) 定容。吸取1.0mL试液于50mL容量瓶中,用碳酸钠溶液定容至刻度。用紫外分光光度计扫描 4.4.3称取试样0.3g~0.5g于100mL的容量瓶中,加人约60mL的冰乙酸溶液(4.1.10),在超声水 sAc浴中超声10min,用冰乙酸溶液定容。精密吸取2mL试液于50mL小烧杯中,加人2,6-二氯靛酚钠 溶液(4.1.11)至溶液为粉红色后,加人2mL酸性植酸酶溶液(4.1.13),于37℃水浴上保持30min,红 色褪去。 4.5.1原理 在pH值为10的条件下,L-抗坏血酸-2-磷酸酯盐在263nm处有最大吸收,且符合朗伯比尔定律, 据此可测出试样溶液的吸光值,根据摩尔吸收系数计算出试样中L-抗坏血酸-2-磷酸酯盐含量。 4.5.2试验步骤 平行做两份试验。称取试样约0.3g(准确至0.0001g),置于250mL棕色容量瓶中,加50mL盐 酸溶液(4.1.8),在超声水浴中超声10min,用碳酸钠溶液(4.1.9)定容。准确吸取1.0mL试液置于 50mL棕色容量瓶中,用40mL碳酸钠溶液溶解,并用盐酸溶液(4.1.8)调节溶液pH值至10,用碳酸钠 溶液(4.1.9)稀释至刻度,摇匀。放置20min后,将试液置于1cm石英比色皿中,以pH值为10的碳酸 钠溶液为空白对照,用紫外分光光度计于263nm士1nm处测定吸收值。 4.5.3试验数据处理 试样中L-抗坏血酸-2-磷酸酯盐含量(以L-抗坏血酸计)1以质量分数(%)表示,按式(1)计算: A×12.5M X100 ...(1) 16000mb 式中: A 试样溶液的吸收值; 12.5 稀释体积,单位为升(L); M —L-抗坏血酸的摩尔质量,单位为克每摩尔(g/mol)(M=176.13); 16000 m 试样质量,单位为克(g); 3 GB7300.201—2019 b 比色皿厚度,单位为厘米(cm)。 试样中L-抗坏血酸-2-磷酸酯盐占标示量的百分数(%)以2表示,按式(2)计算: w2=K标 ...(2) 式中: K标——产品中L-抗坏血酸-2-磷酸酯盐标示量。 平行测定结果用算术平均值表示,保留三位有效数字。 4.5.4精密度 在重复性条件下,获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于0.5%。 4.6L-抗坏血酸-2-磷酸酯盐含量测定——酶解法(仲裁法) 4.6.1原理 在酸性条件下,酸性植酸酶可将L-抗坏血酸-2-磷酸酯盐水解,用2,6-二氯靛酚钠溶液滴定L-抗坏 血酸含量。 4.6.2试验步骤 平行做两份试验。称取试样0.3g~0.5g(精确至0.0001g)于100mL的容量瓶中,加入5mL冰 乙酸(4.1.10),加入约60mL的水,在超声水浴中保持10min,用水定容。 准确吸取10mL的上述试液于100mL具塞三角瓶中,加入5mL偏磷酸溶液(4.1.14),用2,6-二 氯靛酚钠溶液(4.1.11)滴定至粉红色并保持30S即为终点。 分别准确吸取2mL的上述试液和L-抗坏血酸标准溶液(4.1.15)于50mL具塞三角瓶中,分别准确 加人2mL的酸性植酸酶溶液(4.1.13),于37℃水浴上水解1h后,加入5mL偏磷酸溶液,用2,6-二氯 靛酚钠溶液滴定至粉红色并保持30s即为终点。同时做冰乙酸溶液(4.1.10)空白试验。 4.6.3试验数据处理 试样中L-抗坏血酸-2-磷

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