ICS 07.080 G 66 中华人民共和国国家标准 GB/T35534—2017 胰酪蛋白陈检测方法 Examination methods of pancreatic digest of casein 2018-07-01实施 2017-12-29发布 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T35534—2017 前言 本标准按照GB/T1.12009给出的规则起草， 本标准由全国生化检测标准化技术委员会（SAC/TC387)提出并归口。 本标准起草单位：北京牛牛基因技术有限公司、中国食品药品检定研究院， 本标准主要起草人：胡昌勤、牛刚、苏德模、马仕洪、杨美琴、伍业旭、葛秋蕙 GB/T35534—2017 胰酪蛋白陈检测方法 1范围 本标准规定了胰酪蛋白作为培养基原料的质量检测方法 本标准适用于药品、食品、化妆品或其他类别微生物检验用培养基中胰酪蛋白陈的质量检测 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件 GB 4789.28 食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求 GB 5009.3 食品安全国家标准食品中水分的测定 GB 5009.4 食品安全国家标准食品中灰分的测定 GB5009.11一2014食品安全国家标准食品中总砷及无机砷的测定 GB 5009.12 食品安全国家标准食品中铅的测定 GB 5009.15 食品安全国家标准食品中镉的测定 GB5009.175食品安全国家标准食品中总汞及有机汞的测定 GB5009.44—2016食品安全国家标准食品中氯化物的测定 GB5009.124食 食品安全国家标准食品中氨基酸的测定 GB/T 6682 2分析实验室用水规格和试验方法 GB/T23530 酵母抽提物 中华人民共和国药典2015年版四部澄清度检查法（通则0902） 中华人民共和国药典 2015年版四部氮测定法（通则0704） 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 胰酪蛋白陈 Fpancreaticdigestof casein 用酪蛋白经胰酶水解、中和、过滤、浓缩精制而成的粉未。常用名：胰酪陈、胰酶水解酪蛋白等。 3.2 酪蛋白 casein 哺乳动物奶中的主要蛋白质。用于制造培养基用胰酪蛋白陈的酪蛋白主要通过牛奶脱脂后加酸或 粗制凝乳酶的作用，形成的凝固沉淀物制得。又称：干酪素、酪、乳酪素、奶酪素等。 3.3 耐热菌数 count of heat resistant microorganisms 胰酪蛋白陈中存在的具有热抗性的微生物，主要为耐热芽孢菌。胰酪蛋白陈耐热菌数为10%胰酪 蛋白陈溶液在沸水浴中处理30min后，经胰酪大豆陈琼脂（TSA）平板计数得到的菌落数，以CFU/g 表示。 1 GB/T35534—2017 4缩略语 下列缩略语适用于本文件。 CFU：菌落形成单位（colonyformingunits） TSA：胰酪大豆陈琼脂培养基（soybean-caseindigestagar） TSB：胰酪大豆陈液体培养基（soybean-caseindigestbroth） 标准菌株 3 铜绿假单胞菌（Pseudomonasaerginosa)[CMCC(B)10104] 金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus)[CMCC(B)26003] 藤黄微球菌（Micrococcusluteus)[CMCC(B)28001] 枯草芽孢杆菌（Bacillussubtillis）LCMCC（B）6350l」 乙型副伤寒沙门菌（SalmonellaparatyphiB)[CMCC(B)500947 白色念珠菌（Candidaalbicans)[CMCC(F)98001] 6试剂配制 6.1总则 除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，在未特别注明时，按照GB4789.28规定执行。水应符 合GB/T6682中三级水的规定。未注明何种溶液配制时，均指水溶液。未注明何种条件下灭菌时，均 指121℃、15min高压灭菌 6.2 0.5%磷酸氢二钾 称取5gK,HPO4加水定容至1000mL。 6.3 1mol/L氢氧化钠 称取40gNaOH加水定容至1000mL。 6.4 40.9%灭菌氯化钠溶液 称取9gNaCl加水定容至1000mL,灭菌后备用。 6.5 51mol/L氢氧化钾 称取56g氢氧化钟加水定容至1000mL。 6.6 51mol/L盐酸 取浓盐酸约90mL，加水适量使成1000mL，摇匀备用 6.7 TSA 胰酪蛋白陈15g，大豆陈5g，氯化钠5g，琼脂15g，水1000mL 2 GB/T35534—2017 6.8TSB 胰酪蛋白陈17g，天豆陈3g，氯化钠5g，葡萄糖2.5g，磷酸氢二钾（钠）2.5g，水1000mL。 7检测方法 7.1外观 取样品适量，置明亮处，自然光下肉眼观察性状和色泽。 7.2理化指标 7.2.1 pH 配制2%水溶液，采用玻璃电极测定灭菌后的pH值。同一样品两次测定值之差应不超过0.04。 7.2.2水分 按照GB5009.3规定执行。 7.2.3灰分 按照GB5009.4规定执行。 7.2.4澄清度 取样品适量，制备2%水溶液，灭菌后放置至室温，按照《中华人民共和国药典》2015年版四部澄清 度检查法（通则0902）第一法（目视法）执行。 7.2.5磷酸盐沉淀 取样品适量，以0.5%磷酸氢二钾（0.03mo1/L）溶液制备成2%溶液，如需要，调节pH7.5士0.1， 121℃高压灭菌30min后，置20℃士10℃冷却，冷却后平衡30min观察是否有沉淀。 7.2.6碱性沉淀 取样品适量，配制成2%水溶液，以1mol/L氢氧化钠溶液调节pH8.5士0.5，121℃高压灭菌 30min，置20℃士10℃冷却，冷却后平衡30min观察是否有沉淀。 7.2.7氯化钠 7.2.8总氮 按照《中华人民共和国药典》2015年版四部氮测定法（通则0704）规定的方法执行 7.2.9氨基酸态氮 按照GB/T23530规定的方法执行。 7.2.10 0总游离氨基酸 3