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ICS 65. 120 B 46 GE 中华人民共和国国家标准 GB/T 21517—2008 饲料添加剂 叶黄素 Feed additive-Lutein 2008-03-03发布 2008-05-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T21517—2008 前言 本标准的附录B为规范性附录,附录A为资料性附录。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。 本标准起草单位:中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所、国家饲料质量监督检验中心 (北京)、成都枫澜科技有限公司、武汉新华扬生物有限责任公司。 本标准主要起草人:赵小阳、田河山、孙鸣、李巍、詹志春、陶正国、马东霞、王彤、杨文军 本标准首次发布, GB/T21517—2008 饲料添加剂 叶黄素 1范围 本标准规定了饲料添加剂叶黄素产品的分类、要求、试验方法、检验规则及标签、包装、贮存、运输。 炭黑等辅料,有效成分主要是叶黄素和它的同分异构体玉米黄质,也有少量的其他类胡萝卜素和蜡质, 在饲料工业中作为着色剂类饲料添加剂。 分子式:C4oH5O2 相对分子质量:568.88(2001年国际相对原子质量) 结构式: CHs HO CH H) CH: CH. CH,CH, CH: CH. HO CH 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准, GB/T 603 化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备(GB/T603—2002,ISO6353-1:1982, NEQ) GB/T 606 化学试剂水分测定通用方法卡尔·费休法 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682—1992,neqISO3696:1987) GB10648 饲料标签 GB/T13079 饲料中总砷的测定 GB/T13080 饲料中铅的测定原子吸收光谱法 3分类 3.1产品按标示量的不同可分为:1.5%、1.6%、2.0%三种。 3.2根据合同要求确定。 4要求 4.1性状 本品为自由流动的橘黄色细微粉末或橘黄色液体,易氧化,不溶于水,溶于乙醇 4.2技术指标 技术指标应符合表1规定。 1 GB/T21517—2008 表1技术指标 指 项 目 粉状 液体 含量(以CHsO计)(占标示量的百分比)/% ≥90 ≥90 砷/(mg/kg) ≤3.0 ≤3. 0 铅/(mg/kg) ≤10.0 ≤10.0 水分/% ≤8.0 粒度(0.84mm孔径标准筛) 100%通过 pH值 5.0~8.0 5 试验方法 除特殊说明外,所用试剂均为分析纯,水为蒸馏水,色谱用水符合GB/T6682中一级用水规定,标 准溶液的制备应符合GB/T603。 5.1试剂和溶液 5.1.1 正已烷:色谱纯, 5. 1. 2 乙酸乙酯:色谱纯。 5.1.3 正已烷。 5. 1. 4 无水乙醇。 5.1.5 丙酮。 5.1. 6 甲苯。 5. 1. 7 亚硝酸钠。 5.1.8 硫酸。 5.1. 9 亚硝酸钠溶液(50g/L)。 5.1.10 硫酸溶液(0.5mol/L):吸取硫酸(5.1.8)1.5mL缓缓注人100mL水中,冷却,摇匀。 5. 1. 11 提取剂:正已烷十乙醇+丙酮十甲苯=10十6十7十7(体积比)。 5. 2 仪器和设备 实验室常用设备及以下设备。 5.2. 1 超声波水浴。 5.2.2 超纯水装置。 5.2. 3 紫外分光光度计。 5.2.4 石英比色皿(1cm)。 5.2.5 高效液相色谱仪:带紫外可调波长检测器(或二极管矩阵检测器)。 5.2.6 原子吸收分光光度计。 5.3鉴别试验 5.3.1方法一 样品的丙酮溶液在连续加入亚硝酸钠溶液(5.1.9)和硫酸溶液(5.1.10)后颜色消失。 5.3.2方法二 取试样溶液(5.4.2.1),用分光光度计测定,以1cm石英比色血在420nm~480nm波长范围内测 定试样溶液的吸收光谱,应在445nm士1nm、473nm士1nm的波长处有最大吸收峰, 5.3.3方法三(仲裁法) 5.3.3.1原理 叶黄素含量以总类胡萝卜素含量表示,试样中总类胡萝卜素经混合溶剂提取后,注入正相色谱柱 2 GB/T21517—2008 上,用流动相洗脱,分离出叶黄素和玉米黄质,其色谱峰的分离度为3.06~3.09,叶黄素含量应在70% 以上,玉米黄质含量在10%以上,并通过峰面积比例测知其相对含量。 5.3.3.2试液的制备 根据产品含量(参见附录A)称取试样约0.15g~0.2g(精确至0.0002g),置于100mL棕色容 量瓶中,加提取剂(5.1.11)纳80mL,在超声波水浴中加热超声提取20min,冷却至室温,用提取剂 (5.1.11)定容至刻度,混匀,过滤,用移液管准确移取1mL滤液到10mL容量瓶中,用氮气吹干,用流 动相稀释至刻度,混匀,溶液过0.45μm滤膜,供高效液相色谱仪分析。 5.3.3.3色谱条件 固定相:硅胶柱,内径4.6mm,长250mm,粒度3μm。 流动相:正已烷十乙酸乙脂=70十30(体积比),超声脱气。 流速:1.5 mL/min。 检测器:紫外可调波长检测器(或二极管矩阵检测器),检测波长445nm或473nm。 进样量:20μL。 5.3.3.4试样测定 将试样分析液(5.3.3.2),按上述色谱条件进行进样分析,得到叶黄素和玉米黄质,色谱峰见 图B.1。 5.3.3.5结果计算 叶黄素(%)=总类胡萝下素量×叶黄素的峰面积(%) ..(1) 玉米黄质(%)=总类胡萝卜素量×玉米黄质的峰面积(%) ....(2) 5.4叶黄素(以总类胡萝卜素计)含量的测定 5.4.1原理 总类胡萝卜素在波长445nm土1nm处有最大吸收,可根据该波长处测定吸收度和标准百分吸光 系数(Elcm)计算其含量。 5.4.2分析步骤 5.4.2.1试液的制备 根据产品含量(参见附录A),称取试样约0.15g~0.2g(精确至0.0002g),置于100mL棕色容 量瓶中,加约80mL无水乙醇(5.1.4),在超声波水浴中加热超声提取20min,冷却至室温,用无水乙醇 (5.1.4)定容至刻度,混匀,过滤,用移液管准确移取1mL滤液到10mL容量瓶中,用无水乙醇(5.1.4) 稀释至刻度,混匀。 5.4.2.2试样测定 将试样分析液(5.4.2.1)置于1cm石英池中,用紫外分光光度计,在波长445nm士1nm处测定吸 收度A,以无水乙醇(5.1.4)为空白对照。 5.4.2.3计算和结果的表示 试样中叶黄素(CaaHsO,)(以总类胡萝卜素计)含量X以质量分数(%)表示,按式(3)计算: ....3 mX2550 式中: A——试料(5.4.2.1)吸收度; 1000——试料(5.4.2.1)稀释倍数; m 试料质量,单位为克(g); 2550——总类胡萝卜素百分吸光系数(Elcm-2550)。 平行测定结果用算术平均值表示,保留三位有效数字。 5.4.3允许差 同一分析者对同一试样同时两次平行测定结果绝对值之差应不大于0.3%。 3

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