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ICS 65.020.30 B 44 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 14926.62—2001 实验动物 猴免疫缺陷病毒检测方法 Laboratory animalMethod for examination of simian immunodeficiency virus (SIV) 2002-05-01实施 2001-08-29发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 GB/T 14926.62—2001 前言 本标准规定了猴免疫缺陷病毒的检测方法。 猴免疫缺陷病毒主要侵害猴的免疫系统,引起免疫器官的病变和免疫机能紊乱从而干扰实验研 究,是普通缀猴和SPF猴的必检顷目。因此增加该病毒的检测方法, 本标准出中华人民共和国科学技术部提山并归口, 本标准起草中位:中国实验动物学会。 本标准主要起草人:田克恭 I 中华人民共和国国家标准 实验动物 GB/T 14926. 62—2001 猴免疫缺陷病毒检测方法 Laboratnry animal-Method for exanination of simian immunodeficiency virus (SIV) 1范围 本标准规定了猴免疫缺陷病毒(SIV)的检测方法、试剂等, 本标准适用丁猴 SIV 的检测。 2 引用标准 下列标准所包含的条文·通过在本标准中小用而构成为本标准的条文。本标推出版时,所示版本均 为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 GB/T14926.50—2001实验动物酶联免疫吸附试验 GB/T 14926. 52—2001 实验动物免疫荧光试验 3原理 根据免疫学原理,采用 SIV抗原检测猴血清中 SIV 抗体, 4主要试剂和器材 4.1试剂 4. 1. 1 EI.ISA 抗原 4. 1.1. 1 特异性抗原:用 SIV 感染CM-174 细胞,接种 10~~14 d.细胞融合明显时,收获培养液。冻融 三次或超声波处理斥·低速离心去除细胞碎片,上清液再经超速离心浓缩后制成EI.ISA抗原, 4.1.1.2正常抗原:CM-171细胞冻融破碎后,经低速离心去除细胞碎片而获得的上清液 4.1.2抗原片 SIV感染CM-171细胞,接种10~11d,病变达|~||时,800r/min 离心5~~10 min,P13s洗 涤,涂片。室温十燥的同时,在紫外线下20 cm处照射30 min,冷内酮固定10 min。一20C保存。 4.1.3阳性血清 SIV 抗原免疫的猴血清。 4. 1. 4 阴性血清 无SIV感染的猴血清。 4.1.5酶结合物 辣根过氧化物酶标记羊或兔抗猴IgG抗体。 4.1.6异硫氰酸荧光素标记羊或兔抗猴IgG抗体 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2001-08-29批准 2002-05-01实施 1

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