ICS 65.020.30 B 44 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T14926.64—2001 实验动物 猴痘病毒检测方法 Laboratory animalMethod for examination of Simian Poxvirus (SPV) 2002-05-01实施 2001-08-29发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 GB/T 14926. 64 2001 前 本标准规定了猴痘病毒的检测方法。 猴痘病毒属人兽儿忠病原,猕猴是猴痘病毒的白然宿上，猴痘病毒是普通级猴和SPF猴的必检项 H,因此增加该病毒的检测方法 本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归。 本标准起草单位：中国实验动物学会， 本标准主要起克人：田克恭。 中华人民共和国国家标准 实验动物 GB/T 14926. 64—2001 猴痘病毒检测方法 Laboratory animal-Method for examination of Simian Poxvirus (SPV) 1范围 本标准规定了猴痘病毒(SPV)的检测方法、试剂等。 本标准适用于猴SPV的检测， 2 引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中叭用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均 为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 GB/T14926.50一2001实验动物酶联免疫吸附试验 GB/T11926.51—2001实验动物免疫试验 3原理 痘苗病毒与SPV有密划的抗原关系，根据免疫学原埋，采用痘苗病毒抗原检测猴血清中SPV抗 体。 4主要试剂和器材 4.1试剂 4. 1. 1 ELISA 抗原 4.1.1.1特异性抗原：在生物安全柜内,用痘苗病毒感染BHK21细胞接种2~3d斥，当病变达十+ ～」「「时收获。冻融三次或超声波处理后，低逆离心去除细胞碎片·工清液再经超逆离心浓缩后制成 ELISA 抗原， 4.1.1.2正常抗原：13HK21纠胞冻融破碎后·经低速离心去除纠胞碎片而获得的上清液。 4.1.2抗原片 症苗病毒接种 BHK21 细胞,接种后 1～2 d,病变达十十时.在牛物安全柜内,用胰酶消化分散,PIRS 洗涤.涂片，室温干燥的同时，在紫外线下20cm处照射30min,冷丙酮固定10min，一20℃保存。 4. 1. 3 阳性血清 苗病毒抗原免疫的猴血清。 4.1.4阴性血清 尤 SPV、痘苗病毒感染的猴血清： 4.1.5酶结物 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2001-08-29批准 2002-05-01实施 1